ABSTRACT
Abstract The aim of this study was to characterize phenotypically and genotypically 27 mecApositive Staphylococcus aureus strains with oxacillin MICs of ≤2 g/ml by Vitek 2, isolated indifferent regions of Uruguay. Susceptibility to oxacillin and cefoxitin was studied by gradient dif-fusion, disk diffusion to cefoxitin, and Phoenix and MicroScan systems. PBP2a was determined.SCCmec typing was performed and the isolates were compared by PFGE. Twenty-six isolateswere susceptible to oxacillin; one strain was susceptible to cefoxitin by disk diffusion and 3strains by gradient diffusion. Phoenix and MicroScan panels detected methicillin resistance in25 and 27 strains, respectively. Twenty-six strains tested positive for PBP2a. Twenty-six strainscarried SCCmec V and 24 belonged to pulsotype A. One strain carried SCCmec IV and did notbelong to pulsotype A. Cefoxitin disk diffusion test and PBP2a detection correctly identified 26of these 27 strains as MRSA. PFGE results suggest the dissemination of a cluster of MRSA carryingSCCmec V.
Resumen El objetivo de este estudio fue caracterizar fenotípicamente y genotípicamente 27 cepas de Staphylococcus aureus positivas para mecA y con CIM de oxacilina <2 pg/ml según Vitek 2, obtenidas en diferentes regiones del país. La sensibilidad frente a la oxacilina y la cefoxitina se estudió por difusión en gradiente, por disco-difusión (cefoxitina) y por los sistemas Phoenix y MicroScan. Se analizó la portación de PBP2a, se realizó la tipificación de SCCmec y las cepas se compararon mediante PFGE. Resultaron sensibles a oxacilina por difusión en gradiente 26 cepas; una fue sensible a cefoxitina por disco-difusión y 3 lo fueron por difusión en gradiente. Los sistemas Phoenix y MicroScan detectaron resistencia a meticilina en 25 y 27 cepas, respectivamente. Asimismo, 26 cepas portaban PBP2a y 26 cepas mostraron presencia de SCCmec V, 24 correspondieron al pulsotipo A. Una portaba SCCmec IV y no perteneció al pulsotipo A. La prueba de disco-difusión con cefoxitina y la detección de PBP2a identificaron 26 de 27 cepas como MRSA. La PFGE sugiere la diseminación de un grupo MRSA con SCCmec V. © 2022 Asociación Argentina de Microbiología. Publicado por Elsevier Espana, S.L.U. Este es un artículo Open Access bajo la licencia CC BY-NC-ND (https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).
ABSTRACT
Abstract This study was undertaken to investígate the resistance phenotypes to macrolide-lincosamide-streptogramin B (MLSb) antibiotics and their associated genotypes in isolates of Staphylococcus aureus. We analyzed one hundred, consecutive, non-duplicate isolates (methicillin-susceptible MSSA, n = 53 and methicillin-resistant MRSA, n =47) obtained from var-ious clinical samples between July 2012 to December 2013. The resistance profile to MLSb antibiotics was determined by phenotypic methods and the resistance genes were detected by PCR assays. All of the isolates were subjected to pulsed-field gel electrophoresis (SmaI-PFGE). The overall prevalence of resistance to MLSb antibiotics was 38% and the resistance phenotype distribution was as follows: cMLSb, 22%; iMLSB, 10%; MSb, 5% and L, 1%. We detected ermA, ermC, ermB and mrsA/B genes in these resistant isolates. The single ermA gene was commonly observed mainly in those with a cMLSb R phenotype, whereas the combination ermA and ermC was more commonly observed in isolates with inducible expression. The patterns of SmaI-PFGE suggest a great genetic diversity in both MRSA and MSSA resistant to MLSb antibiotics. The results demonstrate the local presence of S. aureus resistant to MLSb antibiotics and its most frequently described responsible genes. Some of these isolates, especially those with the iMLSB phenotype, may be associated with therapeutic failure. Therefore, efforts should be directed to the correct detection of all MLSb resistant isolates using appropriate laboratory tests. PFGE results reveal a wide spread of resistance genes rather than the circulation of S. aureus clones resistant to MLSb antibiotics.
Resumen Los objetivos de este estudio fueron investigar en Staphylococcus aureus la presencia de fenotipos resistentes a los antibióticos macrólidos, lincosamidas y estreptograminas tipoB (MLSb) y conocer sus genotipos responsables. Analizamos 100 aislamientos consecutivos, no duplicados (53 sensibles a meticilina [MSSA] y 47 resistentes a meticilina [MRSA]), obtenidos entre 2012 y 2013 a partir de diferentes muestras clínicas. El perfil de resistencia a los antibióticos MLSb fue determinado por métodos fenotípicos y los genes de resistencia se detectaron por PCR. Todos los aislamientos fueron comparados por SmaI-PFGE. La prevalencia global de resistencia a los antibióticos MLSB fue del 38% y la distribución de los fenotipos de resistencia fue la siguiente: cMLSB, 22%; iMLSB, 10%; MSB, 5%; L, 1%. Se detectaron los genes ermA, ermC y mrsA/B en los aislamientos resistentes. El gen ermA se observó, sobre todo, en aislamientos con fenotipo resistente constitutivo R (cMLSB), mientras que la combinación ermA y ermC se detectó principalmente en aislamientos con resistencia inducible (iMLSB). Los patrones de Smal-PFGE sugieren una gran diversidad genética en los aislamientos resistentes a los antibióticos MLSb, tanto MRSA como MSSA. Los resultados demuestran la presencia local de S. aureus resistentes a los antibióticos MLSB y de sus genes responsables más frecuentemente descritos. Estos cultivos, especialmente aquellos con fenotipo resistente iMLSB, pueden asociarse con fallas terapéuticas. Por lo tanto, los esfuerzos deben dirigirse a la correcta detección de todos los cultivos resistentes a MLSB utilizando pruebas de laboratorio adecuadas. Los resultados de Smal-PFGE sugieren una amplia diseminación de genes de resistencia, más que la circulación de clones resistentes a los antibióticos MLSB.